Uma nova abordagem para o problema antigo: Interior efeito do filtro de tipo I e II em fluorescência

A técnica de fluorescência é muito popular e tem sido utilizado em muitos campos de pesquisa. É simples em suas suposições, mas não muito fácil de usar. Um dos principais problemas é o efeito de filtro interno (IF) I e II que ocorre na cubeta. Se o tipo I está permanentemente presente, mas se o tipo II ocorre apenas quando os espectros de absorção e fluorescência se sobrepõem. Para evitar se o tipo I, as absorvências na cubeta devem ser menores que 0,05, o que, no entanto, é muito difícil de obter em muitos experimentos. Neste trabalho, propomos um novo método para resolver esses problemas no caso de um Fluorímetro Cary Eclipse, tendo fendas orientadas horizontalmente, com base em equações antigas desenvolvidas em meados do século passado. Este método pode ser aplicado para outros instrumentos, mesmo estes Com Feixes orientados verticalmente, porque compartilhamos scripts escritos no ambiente MATLAB e GRAMS / AI. Os cálculos em nosso método permitem especificar parâmetros de geometria de feixe na cubeta, o que é necessário para obter a forma correta e a intensidade de fluorescência dos espectros de emissão e excitação. Tal específicas de intensidade de fluorescência a dependência de absorvância pode, em muitos casos, dar possibilidades para determinar o rendimento quântico (QY) usando pistas da reta de linhas, o que foi demonstrado com o uso de Triptofano (Trp), Tirosina (Tyr) e Rodamina B (RhB) soluções. Por exemplo, supondo que QY=0,14 para Tyr, o QY determinado para RhB atingiu QY=0,71±0.05, embora a medição para Tyr e RhB tenha sido realizada em uma faixa espectral completamente diferente.