een nieuwe benadering van het oude probleem: Binnenfiltereffect type I en II in fluorescentie

de fluorescentietechniek is zeer populair en is op vele onderzoeksgebieden gebruikt. Het is eenvoudig in zijn veronderstellingen, maar niet erg gemakkelijk te gebruiken. Een van de grootste problemen is het binnenfiltereffect (IF) I en II dat in de cuvette plaatsvindt. Als type I permanent aanwezig is, maar als type II alleen optreedt wanneer absorptie-en fluorescentiespectra elkaar overlappen. Om type I te vermijden, moeten de absorbenties in de cuvet kleiner zijn dan 0,05, wat in veel experimenten echter zeer moeilijk te verkrijgen is. In dit werk stellen we een nieuwe methode voor om deze problemen op te lossen in het geval van een Cary Eclipse fluorimeter, met horizontaal georiënteerde spleten, gebaseerd op oude vergelijkingen ontwikkeld in het midden van de vorige eeuw. Deze methode kan worden toegepast voor andere instrumenten, zelfs deze met verticaal georiënteerde balken, omdat we delen scripts geschreven in MATLAB en gram/AI omgeving. De berekeningen in onze methode maken het mogelijk de parameters van de straalgeometrie in de cuvette te specificeren, die nodig zijn om de juiste vorm en fluorescentieintensiteit van emissie-en excitatiespectra te verkrijgen. Een dergelijke specifieke afhankelijkheid van absorptie van de fluorescentieintensiteit kan in veel gevallen mogelijkheden bieden om de kwantumopbrengst (QY) te bepalen met behulp van hellingen van de rechte lijnen, wat werd aangetoond met het gebruik van tryptofaan (Trp), Tyrosine (Tyr) en Rhodamine B (RhB) oplossingen. Bijvoorbeeld, aangenomen dat QY = 0,14 voor Tyr, de QY bepaald voor RhB bereikt QY=0,71±0.05, hoewel de meting voor Tyr en RhB werd uitgevoerd op een totaal ander spectraal bereik.