uusi lähestymistapa vanhaan ongelmaan: Inner filter effect type I and II in fluoresence

Fluoresenssitekniikka on hyvin suosittu ja sitä on käytetty monilla tutkimusaloilla. Se on yksinkertainen oletuksiltaan, mutta ei kovin helppo käyttää. Yksi suurimmista ongelmista on sisäinen suodatin vaikutus (IF) I ja II, joka tapahtuu cuvette. Jos tyyppi I esiintyy pysyvästi, mutta jos Tyyppi II esiintyy vain absorptio-ja fluoresenssispektrien päällekkäisyydessä. I-tyypin välttämiseksi imukyvyn tulisi olla pienempi kuin 0,05, mikä on kuitenkin hyvin vaikea saada monissa kokeissa. Tässä työssä ehdotamme uutta menetelmää näiden ongelmien ratkaisemiseksi, kun kyseessä on Cary Eclipse fluorimetri, ottaa vaakasuoraan suuntautunut rakoja, perustuu vanhoihin yhtälöt kehitetty keskellä viime vuosisadalla. Tätä menetelmää voidaan soveltaa myös muihin mittalaitteisiin, jopa näihin pystysuuntaisilla palkeilla, koska jaamme Matlab-ja Gramms/AI-ympäristössä kirjoitettuja skriptejä. Menetelmämme laskelmat mahdollistavat sädegeometriaparametrien määrittämisen cuvettessa, mikä on välttämätöntä emissio-ja magnetaatiospektrien oikean muodon ja fluoresenssin intensiteetin saavuttamiseksi. Tällainen ominaisfluoresenssin intensiteetin riippuvuus absorbanssista voi monissa tapauksissa tarjota mahdollisuuksia kvanttisadon (QY) määrittämiseen suorien linjojen rinteillä, mikä osoitettiin käyttämällä tryptofaani (Trp), tyrosiini (Tyr) ja Rodamiini B (RhB)-liuoksia. Jos esimerkiksi oletetaan, että QY=0, 14 Tyrille, RhB: lle määritetty QY saavutti QY=0, 71±0.05, vaikka Tyrin ja RhB: n mittaus suoritettiin täysin eri spektrialueella.