en ny tilgang til det gamle problem: indre filtereffekt type I og II i fluorescens

fluorescensteknikken er meget populær og er blevet brugt inden for mange forskningsområder. Det er enkelt i sine antagelser, men ikke meget let at bruge. Et af hovedproblemerne er den indre filtereffekt (IF) I og II, der finder sted i kuvetten. Hvis type I er permanent til stede, men hvis type II kun forekommer, når absorption og fluorescensspektre overlapper hinanden. For at undgå if type I skal absorptionsevne i kuvetten være mindre end 0,05, hvilket dog er meget vanskeligt at opnå i mange eksperimenter. I dette arbejde foreslår vi en ny metode til at løse disse problemer i tilfælde af en Cary Eclipse fluorimeter, der har vandret orienterede slidser baseret på gamle ligninger udviklet i midten af forrige århundrede. Denne metode kan anvendes til andre instrumenter, selv disse med lodret orienterede bjælker, fordi vi deler scripts skrevet i MATLAB og gram/AI miljø. Beregninger i vores metode gør det muligt at specificere strålegeometriparametre i kuvetten, hvilket er nødvendigt for at opnå den korrekte form og fluorescensintensitet af emissions-og eksitationsspektre. En sådan specifik fluorescensintensitetsafhængighed af absorbans kan i mange tilfælde give mulighed for at bestemme kvanteudbyttet ved hjælp af skråninger af de lige linjer, hvilket blev demonstreret ved anvendelse af tryptophan (Trp), tyrosin (Tyr) og Rhodamin B (RhB) opløsninger. Hvis man f.eks. antager, at KY=0,14 for Tyr, nåede KY bestemt for RhB KY=0,71 LH 0.05, skønt målingen for Tyr og RhB blev udført i et helt andet spektralområde.